Blood collection via orbital sinus --- 眼窝取血

单看“眼窝取血”这四个字，就会觉得恐怖了。确实是挺恐怖的，不过其实不是从眼球取的血，是眼窝里的血管，但还是很可怕的。其实取血的方法有很多中(见reference)，从眼窝取血只是其中一种，其他的比较普遍的还包括尾巴静脉(tail vein)取血、脚静脉(saphenous vein)取血、心脏取血(cardiac puncture)。

http://www.umic.sunysb.edu/newitems/LAB1607.pdf

http://www.umic.sunysb.edu/newitems/LAB1607.pdf

http://www.umic.sunysb.edu/newitems/mouseblood.pdf

眼窝取血首先要麻醉老鼠。老鼠麻醉了之后就可以开始进行了。如果有助手帮忙就更好，因为这个过程一个人两只手比较难应付。

要准备的东西包括pasteur pipette或者haematocrit tubes(用来取血的)，然后还有收集血液样本的小eppendorf tubes，和纱布。

首先把取血的“武器”对准老鼠眼睛的medial canthus，然后呢，在老鼠目睽睽之下，对了，就“插”进去吧。Medial canthus是眼睛的旁边，不是眼球中间噢。当然插进去的时候不能很大力，要慢慢施力，而且轻轻转动武器。目的是要戳破里面的血管，破了之后血就会流出来，就轻轻把武器提出来一点点，这时因为capillary action血液会自动流上pasteur pipette或者haematocrit tubes里。

http://www.umic.sunysb.edu/newitems/mouseblood.pdf

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替小鼠取血有限制，不能取太多，不然它会失血过多。一般我取100-200microlitres已经很足够了。血取得差不多时，就要把武器交给助手，让他负责把武器中的血液放进小瓶子里，他可以用一个pipette bulb把pasteur pipette里的血液弄出来。而我自己呢，就要在这时马上拿着纱布盖住老鼠的眼睛，以止血，这个步骤非常重要。

通常按了一段短时间后就能移开，移开时用纱布让老鼠的眼皮盖着。如果过程做得好，一般不会给老鼠造成太大伤害。但是如果技巧不好，会造成老鼠失明的噢。

如果戳了很久还是没有血出来，可能是位置错了，角度错了，反正一定有东西错了就对。最重要是能很快地针对情况找到对策。因为你不可能一直不停地戳半个小时的。

以前我做这个步骤，是不替老鼠打麻醉针的，就这样用手restraint着老鼠，然后活生生这样插进去。有时候会听到老鼠疼痛而呻吟的叫声，感觉到老鼠在我的紧握之下不停尝试挣扎，弄到我的手都开始抖了，但又要镇定，不然会拖更久。所以眼球取血是我觉得最难受的行为之一，也是让我觉得自己最残忍的行为。当时我常常告诉自己，自己的行为是为了科学，为了工作，不是为了满足自己的欲望。

那时候取了血之后放开老鼠时，它已经快要奄奄一息了，也不怎么会动弹，就躺在那里，很辛苦的样子。可以想象这样的过程有多疼痛。有大概两只老鼠在这样的严重trauma下突然暴毙。我当时心里还蛮难过的。

后来终于跟上司争取到要使用麻醉针才取血。少了老鼠的挣扎和呻吟却不代表心里难受的感觉也会跟着减少。做一个研究员，心理建设还真的很重要的。

所以呢，从眼睛取窝就是这样啦，但这个过程需要不少勇气和坚定的心。有些事情不能失手，也不能重做，眼球取窝就是这样的一种事情。想想看，如果你戳了很久还不成功，老鼠已经承受了那么多的伤害，你还要三番四次尝试，这样是不是对它来说很残酷？

还是那句，胆大心细。




Venus

注：

http://www.umic.sunysb.edu/newitems/mouseblood.pdf - 很好的文章，介绍了各种取血方法。
http://www.umic.sunysb.edu/newitems/LAB1607.pdf - 详细介绍了从saphenous vein取血http://www.ibms.sinica.edu.tw/html/sup2/tech_sup.html(中文) - 各种取血方法简介
http://research.uiowa.edu/animal/?get=mse_tech - 各种取血方法简介