Intraperitoneal Injection (IP) --- 腹腔注射

IP是一个很普通的注射方式。哺乳类动物的腹部，有所谓的腹腔(peritoneal cavity)。腹腔里面有腹部的器官，和血管等。腹腔由一层腹腔膜所覆盖。所以我们肚皮的下面，还有一层腹腔膜，腹腔膜里面才是腹部器官。

要进行IP，一样也要先替老鼠量体重，计算剂量。一般我都是打0.5ml的液体进入老鼠腹腔，小鼠(mouse)腹腔不大，太多的液体不太适合，所以习惯了打0.5ml。剂量就要根据这个来计算。

举例，你有一瓶毒素，剂量为10mg/ml。而你打算给老鼠打的剂量是5ug/g in 0.5ml：
*ug是microgram，比mg少1000倍*

Drug Stock: 10mg/ml
Desired dosage: 5ug/g

For example, a mouse weighs 25g,
for 1g of mouse inject 5ug of drug,
hence 5ug x 25g=125ug for a 25g mouse.

To inject 0.5ml into the mouse,
you have to have a concentration of 250ug/ml of your drug.
1ml contains 250ug, hence 0.5ml contains 125ug.

Dilution from the drug stock of 10mg/ml to 250ug/ml: 1:40 times dilution.
For example, if you want to prepare 2ml of 250ug/ml, then add 50ul of the stock to 1950ul of buffer.

像上面这种算术，是生物学要求的最基本数学，也是最常用的算术。

算好了剂量，做好了稀释(dilution)之后，就开始要load进针筒里。一般我打IP都用26G的针头。针头的大小(diameter)跟gauge(G)的数目成反比，即号码越小，针头越大。26G蛮细的，适合打小鼠的肚子。针筒里最好不要有泡泡，不然volume不准确，还有打IV的话你是不要把气泡打进人家的血管里面的罗。

要弄掉针筒里的泡泡，我一般的做法是，先提取了一定volume的液体，然后倒反针筒，往后拉plunger，拉到上面出现很多空位，再慢慢从后面推plunger上去，最后把所有气体推出针筒，让针筒满满都是液体。如果这时发觉不够液体，可以再提取，由于之前以把气体弄出，再提取就不会再有泡泡了。

在注射之前，这些全部要准备好。针头的盖子也要先弄松掉，不然一会儿单手是很难做这些的。然后就开始restraint老鼠，记得要看清楚身份证才抓，不要抓错老鼠打错针，哈哈。

老鼠抓好后，让鼠头往下，这样子腹腔里的内脏会比较靠向头部，就可以防止把液体打入腹腔里的内脏了。我一般习惯打老鼠右边的腹腔，因为我用右手打针，另外也是因为胃和肠会倾向于左边。打针的部位是lower right quadrant。其实老鼠身体很小，所谓lower right，也就那几个位置而已。如果你打的是母老鼠，那些地方有乳头，就是差不多对了。先用一点酒精擦擦要打的部位。

大概把针头倾斜一个45度(相对于老鼠的身体)，不要打太靠近midline，因为那里有膀胱等。插进去的时候最好把针头尖的地方向下(所谓的bevel up)，这样就比较尖利，比较容易进去。

http://research.uiowa.edu/animal/mp16.jpg

http://ihome.ust.hk/~webacf/files/Mice/mice-tech.ppt

最好是能把拿针筒的手指靠在另外一只手上面，有一个支撑，就不用凌空。凌空容易手抖。插进去不用很深，然后开始往后拉plunger。往后拉的目的是要确保不要刺到肠子或者膀胱，因为如果刺进去这些地方，往后拉会看到液体或半固体出现在针筒里，这时就知道打错地方了。真正在腹腔里面的话，往后拉不会拉出什么东西来的，会出现有点像真空的拉力在针筒里面。

如果打错地方了就要把针拔出来再打一次。如果确定了在腹腔里面的话，就可以开始注射(推plunger)了。注射的时候速度不快不慢，最重要是不要紧张，不要手抖，不然你要推plunger变成推整支针，针就会越插越近，伤害到老鼠。

如果针插得不够进，就会变成皮下注射(SC)了，这时你会看见你所注射的东西慢慢在老鼠的皮下累积成一个小包，这就代表打错了，可以把针拉出来再试。

打完之后放开老鼠的时候要谨慎一点，记得先抓住尾巴才松开它的颈项。

一般这样打针如果熟练的话，不用5分钟就可以了，而且一般不需要别人帮忙，可以独自完成。但如果不熟悉，可能需要不少训练。所谓熟能生巧，真是千古不变的道理啊。




Venus

注：

http://www.pubmedcentral.nih.gov/pagerender.fcgi?artid=377659&pageindex=1 - 这里有一个研究，看IP打针错误的频率和一般打错的位置。

http://www.pubmedcentral.nih.gov/articlerender.fcgi?tool=pubmed&pubmedid=5418953 - 这也是一篇说IP打针位置的文章。

http://www.rit.edu/~gtfsbi/hytc/injection.htm - 解释IP的步骤。

http://www.ibms.sinica.edu.tw/html/sup2/tech_sup.html (中文)- 各种注射方法的概括

http://research.uiowa.edu/animal/?get=mse_tech - 各种注射方法的概括